通常，分光光度计确定波长都采用如下两种方法：　　

1、零级光查找法

该法是利用光谱带上零级光处波长等于零，而能量大这一特点实现的。该方法的特点是简单，可适用于可见分光光度计，也可适用于紫外可见分光光度计，缺点是由此法确定的波长精度不高，重复性也不好，谱元低档仪器用此法，如1102，1500,1502等；　　

2、氘灯能量谱线查找法

该法是利用氘灯点亮后其固有的能量谱线（656.1nm）来确定波长的。从氘灯能量分布图中看出，在可见光的656.1nm处,氘灯有一个脉冲式的能量峰出现，光度计在开机以后，先找到该处的能量大值，确定此点为656.1nm。该方法的特点是简单，所确定波长准确，重复性也很好。但只能用于紫外可见分光光度计，而不能用于可分光光度计。

二、微量分光光度计的自检过程　　　　

微量分光光度计在自检过程中通常要完成以下自检项目：A灯源检查；B滤色片检查；C自动样品架检查（若有安装的话）；D数据通讯口检查；E定波长；F能量检查等。