1、开始运行仪器

打开荧光定量PCR仪底座开关，再打开定量PCR仪检测器开关。实验前先让系统预热30分钟，打开电脑，启动iQ5软件。

2、放置样品

将PCR反应体系加入到0.2ml的薄壁管或96孔板中，盖上管盖。注意，必须带一次性塑料手套，不要让手指接触到反应管表面。将反应管按顺序放入仪器的加热孔中。

3、设置程序，运行实验定量PCR软件操作基本步骤为：

a.设置热循环程序文件（Protocolfile）
b.设置反应板文件（PlateSetupfile）
c.点击“Run”键,运行程序
d.数据分析

4、荧光定量PCR仪测量结果分析

①PCR反应结束后，软件会自动计算标准曲线和Ct值等。

②如需进行表达量分析、等位基因分析等，在软件窗口选择相应分析功能。

③点击右上方的“Report”键，还可输出结果报告单

5、关闭运行仪器

实验结束后关闭iQ5软件、荧光定量检测器及扩增系统电源，关闭电脑，取出反应管。